中医情志病基础研究新进展
中国中医药报 2010-10-28
第二届“情绪与健康和疾病及其中医药干预”国际学术研讨会暨全国第四次中医基础理论学术年会专家发言摘要（一）
治疗抑郁症补虚药居首位
河南中医学院 司富春
抑郁症是一组以情绪低落为主要特征的常见精神障碍，近年来随着社会心理压力的增大，发病率呈逐年上升的趋势。我们通过对1979年1月~2010年8月中国期刊数据库（CNKI）收录的中医诊治原发性抑郁症和继发性抑郁症文献，通过频度分析总结中医证型和方药特点，以探讨抑郁症中医辨证论治规律。
对收集的82篇文献中的证型、症状、方剂和药物进行统计归类，总结各证型、症状、方剂和药物出现频次和所占比例。统计发现，原发性抑郁症证型31个，肝气郁结、心脾两虚、肝郁脾虚、肝郁痰阻、肝肾阴虚占57%；继发性抑郁症证型29个，肝气郁结、心脾两虚、肝郁脾虚、肝肾阴虚、肝郁化火占56.4%。从证候病机分析来看，其基本病机以情志不舒导致气机郁滞为主。或以情志为诱因，或因于痰湿等有形之邪内阻于气机，或肝血虚而肝体失于荣养，肝之疏泄功能失常，肝气郁结，导致情志抑郁。
统计结果显示，原发性抑郁症用方剂320首，继发性用方剂98首，多用成方，以柴胡疏肝散、归脾汤、甘麦大枣汤、半夏厚朴汤较常用。原发性抑郁症用药共160种，前三位是补虚、清热、安神类药，使用频次占51.2%；继发性抑郁症用药共133种，前三位是补虚、清热、解表类，使用频次占51.8%。
补虚药居第一位，分别占31.1%和32.9%。久郁伤正，脾运不健，气血生化乏源是导致虚证的重要原因，典型表现有气虚和火郁伤阴等。
清热药居第二位，分别占10.2%和10.5%。抑郁症的基本病机是肝气郁结，可见精神抑郁、悲忧欲哭、情绪低落、多思善虑、急躁易怒、善太息等。肝气郁结还可以生痰、化火、动风， 表现复杂的临床证候。
第三位的在原发性抑郁症中是安神药，占9.9%。情志虽分属于五脏，而心在情感活动中起主导统帅作用，可调节人的心理活动。心神失养常见失眠多梦，健忘等症状，因此安神药在治疗抑郁症中具有重要的作用。继发性抑郁症治疗中排第三位的是解表药，占8.4%。其中柴胡的引用频次最高。这与柴胡条达肝气，疏肝解郁的功能主治有关。
居住入侵法可更好模拟情志
异常引发PMS肝气郁证过程
山东中医药大学 乔明琦 张惠云等
我们在前期工作中创建了慢性束缚应激制备经前期综合征（PMS）肝气郁证大鼠模型，但此法躯体应激明显，对实验结果造成较大干扰，因此又将国外应用成熟的居住入侵法引入PMS肝气郁证造模，并用旷场实验、悬尾实验等行为学方法系统评价大鼠的造模效果，比较两种造模方法的优劣。
行为学评价的实验结果显示，相较于悬尾实验，旷场实验可以更好的了解受试动物活动量、认知能力、紧张度、对外界兴趣度等多方面综合信息，分析旷场实验结果可见，与正常组大鼠相比，两种模型组大鼠非接受期的水平得分、垂直得分及旷场实验总分均显著减少，分别应用经前舒颗粒干预后，两组得分均恢复至正常水平；两种模型组大鼠接受期的水平得分、垂直得分及旷场实验总分与正常组相比均无差异（P>0.05），这种表现与PMS肝气郁证患者经前抑郁，经后抑郁症状消失的表现有一定程度的相似。悬尾实验结果显示与正常组大鼠相比，两种模型组大鼠非接受期和接受期的悬尾不动时间均显著增加（P<0.01），这提示悬尾实验作为经典的抑郁行为学造模方法和测定抑郁情绪的行为学评价方法也许并不适合评价PMS肝气郁证的大鼠模型。
本实验结果显示，慢性束缚造模法和居住入侵造模法制备PMS肝气郁证大鼠模型均能有效模拟人类的经前抑郁、经后抑郁症状消失的状态，旷场实验结果显示两种方法间并无显著性差异（P>0.05），本实验采用居住入侵法制备PMS肝气郁证大鼠模型属国内国际首创。居住入侵作为一种社会心理应激造模法，能更好地模拟临床情志异常引发PMS肝气郁证的过程。但采用居住入侵法制备模型的造模成功率低，而且模型稳定性方面也有待于进一步考查。
脑-平滑肌轴假说在肝藏象
与应激性疾病间发挥枢纽作用
中南大学湘雅医院 黄熙等
通过实验，我们提出了“脑-平滑肌（Brain-smooth muscle，B-SM）轴”的假说。B-SM轴是指在特有脑区与平滑肌之间存在一个双向性地影响、反馈与调节的神经内分泌通路，通过一些局部的CYP酶与内源性活性物质，在中枢与器官/血管平滑肌之间进行调节，主要应对一些应激性疾病（特别是抑郁病）。这有别于并有可能统领现有的脑-肠轴、脑-皮肤轴、下丘脑-垂体-卵巢轴、下丘脑-垂体-肾上腺轴（四轴）等。脑-平滑肌轴在肝藏象（藏血主疏泄）与应激性疾病（主要为抑郁症共病）之间发挥枢纽作用，成为两者发病学机制与治疗靶，这个假说的完善与求证将为研究抑郁症与肝藏象作出重要贡献。
文献及我们的实验证据表明：1.抑郁症中40%~50%伴消化道躯体症状，功能性下丘脑闭经主要伴随抑郁，抑郁症夜尿大于常人3~6倍，心脑缺血引起的抑郁等，共同的病理生理之一是脑-内脏或血管平滑肌障碍；2.疏肝理气方药同步抗抑郁，促肠蠕动、舒缩血管，从而突破当代一线SSRIs（选择性5-HT再摄取抑制剂）抗抑郁抑动力瓶颈，且吸收成分在海马、肠与血管壁富集。3.其他现代涌现的脑与外周的轴理论，如脑肠轴、脑-皮肤轴、下丘脑-垂体-卵巢轴和下丘脑-垂体-睾丸轴等，均分布对应不同的抑郁与胃肠病、不育等的共病，在名称术语上，轴的一端的“中枢（脑）”相同，另一端的“外周（肠、皮肤、卵巢与睾丸）”各异，而B-SM轴用一个假说，可统一地自圆其说上述多个抑郁症共病，并且轴的两端一致，分别是脑与平滑肌，反映共性病理生理本质。4.脑-平滑肌轴假说在肝藏象与应激性疾病间发挥枢纽作用。
肝郁证
可能具有肿瘤易感性倾向
南方医科大学中医药学院 吕志平 孙学刚等
我们课题组应用蛋白质组学、基因组学和代谢组学等组学法研究了“肝郁证”模型的证侯本质及逍遥散的干预作用。
课题组应用慢性束缚应激的方法复制大鼠“肝郁证”模型，模型大鼠出现懒动倦怠，反应迟钝，安静喜卧，贴壁蜷缩等症状，糖水消耗、摄食、运动评分（敞箱实验）减少，促肾上腺皮质激素释放激素和皮质酮增高，表明“肝郁证”模型复制成功；逍遥散能够在一定程度上改善上述变化，表明逍遥散能够有效干预大鼠的“肝郁证”。
蛋白质组学研究分离、鉴定出具有明显表达差异的6个血清蛋白质和3个肝组织蛋白质。其中肝郁证模型大鼠转甲状腺素蛋白以及芳基硫转移酶和酰烯辅酶A水合酶的表达下降，该结果提示慢性应激能够增加癌症的易感性。基因芯片研究发现肝郁证模型大鼠与正常大鼠海马的差异表达基因共有48个，表达上调的基因15个，表达下调的基因33个；逍遥散干预后大鼠与模型大鼠海马的的差异表达基因共有22个，表达上调的基因7个，表达下调的基因15个。其中脑源性神经营养因子（BDNF）在模型组表达下调，逍遥散组大鼠海马BDNF基因表达上调；色氨酸羟化酶1（Tph1）在模型组表达上调，逍遥散组Tph1基因表达下调；Midkine基因在模型组表达上调，逍遥散组Midkine基因未见显著变化。代谢组学研究发现模型组与空白对照组两组之间的区别主要表现在乳酸、血糖、磷酸胆碱、3-羟基丁酸以及肌酸等物质含量的差异上；模型组与逍遥散组之间的区别主要表现在极低密度脂蛋白和低密度脂蛋白、O-乙酰糖蛋白、N-乙酰糖蛋白、磷脂酰胆碱以及不饱和脂肪酸等物质含量的差异上。
蛋白质组学研究发现肝郁证组转甲状腺素蛋白水平降低；基因组学研究发现Midkine基因在肝郁证组表达上调；代谢组学研究发现肝郁证组免疫监视、抗氧化、抗损伤物质水平降低，提示肝郁证可能具有肿瘤易感性倾向。我们基于上述发现，将进一步在临床上展开肝郁证与肿瘤发生相关性的调查和分析研究，提升肝郁证的内涵研究。
获取肝疏泄倾向
个体差异的神经电生理证据
河南中医学院 詹向红
山东中医药大学 乔明琦等
众所周知，传统的中医藏象生理学知识主要来自于用肉眼对生命现象的观察比较，通过疗效分析反证，以及简单的逻辑推理，是一种描述性的理论（假说）。2006年以来，我们课题组在国家973计划和国家自然基金资助下，用实验方法研究正常人群“疏泄”这一生命现象，取得了阶段性成果，在一定程度上弥补了临床和动物实验的不足，力争创新发展基于实验证据的中医藏象理论。
肝主疏泄，是情志调节的核心，其在志为怒。怒是基本情绪之一，又是负性情绪的核心，对个体及社会的危害尤为突出，许多重大的心身疾病往往可以追溯到情绪的长期愤愤不平。因而，本研究从愤怒情绪切入，以健康在校大学生为被试，以电影片段诱发目标情绪，按宣泄和抑制指导语进行情绪调节，采用情绪诱发和情绪调节动态加工的实验范式，探讨情志调节下机体的外周生理反应，从而揭示肝疏泄科学内涵的一个侧面。同时，借助先进的事件相关电位（ERP）技术，获取肝疏泄倾向个体差异的神经电生理证据。
本课题制作分化和单一性优良的诱发正常人群愤怒情绪的影片片段，并进行实验标准化评估，弥补了国际情绪图片系统（IAPS）愤怒情绪图片不易收集和国内外影片片段所诱发情绪弥散性高的缺憾；研究了肝行使疏泄功能的部分外周机制及疏泄影响因素，并借助ERP技术发现了肝疏泄倾向个体差异的神经电生理证据，为中医传统的“疏泄”理论增添了新的认识。
滋补脾阴方药可改善
糖尿病脑病大鼠认知功能
大连医科大学中西医结合研究院 战丽彬等
糖尿病脑病是糖尿病在中枢神经系统的并发症之一，表现为逐渐出现的轻中度认知功能障碍。糖尿病主要病机以阴虚为本，燥热为标。滋补脾阴方药功善滋阴益气，培土生津，课题组既往研究证明滋补脾阴方药对老龄或痴呆大鼠的学习记忆能力有良好的改善作用。
为探索糖尿病脑病大鼠海马中潜在的认知损伤发生机制，以及滋补脾阴方药的干预靶点，我们将大鼠随机分为对照组、糖尿病脑病组和滋补脾阴方药干预组。以高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素注射建立2型糖尿病模型，利用荧光差示凝胶电泳DIGE，结合基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱仪分析的蛋白质组学方法，对大鼠海马蛋白质表达变化进行分析，鉴定疾病相关差异表达蛋白。结果共发现23个疾病相关差异表达蛋白，鉴定出其中7个蛋白，其中在糖尿病脑病组有3个表达下调，4个表达上调，这些蛋白分别涉及细胞能量代谢、细胞骨架调节及氧化还原状态等方面。经滋补脾阴方药治疗这些分子的异常得到不同程度的纠正。
由此得出结论，糖尿病脑部大鼠认知损伤的出现可能涉及海马中细胞能量代谢、细胞骨架调节及氧化还原状态等多环节的改变，滋补脾阴方药能够多靶点、双向调节蛋白表达异常，从而改善糖尿病脑病大鼠的认知功能。
中医情志病研究要规范化
辽宁中医药大学基础医学院 吕爱平
中医情志病分散于临床各科，包含的病种复杂。目前，中医学界有关情志病的研究报道很多，但是临床病例经验性介绍多，具体实质性研究少。因此，建立情志病临床研究的规范化诊疗体系是当务之急。
关于情志病的诊断研究，应继承传统辨病和辨证的规范化程序；同时要吸收现代心身医学的心理诊断和躯体诊断两部分内容。作为情志病的诊断要点，首先要有明确的情志因素，其次要确认是否有躯体症状，并搞清两者的时间关系。在情志病的病史采集中，要注意与临床内、外、妇、儿各科病史采集的异同；注意收集病人心理社会方面的有关材料；最后进行规范的综合分析，根据程序中收集的材料，结合情志病的基本理论，对是否为情志病、是何种情志病作出恰当的诊断。
关于情志病的治疗研究，在明确诊断为情志病以后，应该采取心身同治原则。对于急性发病、躯体症状严重的情志病病人，应以躯体对症治疗为主，辅之以心理治疗。对于以心理症状为主、躯体症状为次，或虽然以躯体症状为主但已呈慢性经过的情志病病人，则可在实施常规躯体治疗的同时，重点安排好心理治疗。挖掘和整理情志疗法的合理内涵，制定明确的使用范围和操作程序具有重要的意义。
逍遥散有良好抗应激作用
北京中医药大学 郭晓玲 陈家旭 梁媛等
肝郁脾虚证是亚健康的常见证候，严重影响着人们健康，逍遥散作为治疗肝郁脾虚证的经典名方，在临床有相当好的效果。
以往研究提出，肝是人体应激的调节中心，而肝主疏泄功能失常是应激反应发生的重要机制之一。过度的慢性应激会引起下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴持续激活，引发内环境紊乱或疾病。边缘系统与下丘脑在结构和功能上密切相关，特别是海马和杏仁核部位为应激系统的高位调节中枢，慢性应激会导致海马结构和功能的改变。而杏仁核和海马在应激反应中兴奋性并不一致，两者在应激反应调节中充当的角色可能不同。课题组前期的工作显示，逍遥散有良好的抗应激效果，对慢性束缚应激导致的肝郁脾虚大鼠海马和杏仁核区AMPA受体数量的改变有双向调节作用。为了进一步明确海马和杏仁核在束缚应激状态下兴奋性的变化及逍遥散的应激调节机制，我们采用21天慢性束缚应激肝郁脾虚动物模型，同时在右侧杏仁核区注射AMPA受体拮抗剂6-氰基-7-硝喹啉-2，3-双酮（CNQX）拮抗杏仁核AMPA受体，抑制其兴奋性，来观察海马CA1、CA3及DG区GluR1的变化。
结果发现，慢性束缚应激致肝郁脾虚模型组的GluR1在海马CA1区和DG区的表达，与正常组相比都有增加的趋势，而逍遥散组、CNQX组和逍遥散与CNQX联合组对此都有一定的下调作用；而模型组的GluR1在CA3区的表达，与正常组相比都有减少的趋势，逍遥散组、CNQX组和逍遥散与CNQX联合组对此都有一定的上调作用。可见遥散对肝郁脾虚证的治疗作用，与杏仁核注射AMPA受体拮抗剂后对海马起到的保护作用的机理相同。（海霞 整理）
