人血白蛋白多聚体含量及人血丙种球蛋白中lgG各组份测定（高压液相凝胶柱色谱法）
1 仪器
1.1 高压液相泵
1.2 高压液相色谱柱：TSKG3000SW(直径7.5mm,长60cm)。TSk Guard Column SW（直径7.5mm，长7.5cm）。
2 试剂
2.1 贮存液A：0.5mol /L NaH2PO4,pH4.8
称39g NaH2PQ4·2H2O，用超纯水溶解，并稀释至500ml。
2.2 贮存液B：0.5mol /L Na2HPO4
称179.1g Na2HPO4·12H2O，用超纯水溶解，并稀释至1000ml。
2.3 工作液C：0.2mol /L 磷酸盐缓冲液，Ph7.0（含1%异丙醇）
准确量取200ml贮存液A、420ml贮存液B、914.5ml超纯水、15.5ml异丙醇，混匀，用0.45μm水溶性膜过滤并超声脱气。
3 样品处理
用生理盐水将样品稀释至4mg/ml，然后用0.45μm水溶性膜过滤。
4 操作
用工作液C以0.6ml/分钟流速平衡高压液相系统至基线平稳。取处理过的样品25μl上柱，用工作液C以0.6ml/分钟流速洗脱，同时在紫外检测器280nm波长下记录色谱图及有关数据。记录数据的时间为60分钟。
5 计算
5.1 人血白蛋白多聚体含量计算
用高压液相系统的色谱工作站或积分仪对试验结果进行数据处理，算出多聚体相对面积百分含量。再根据转化公式换算成相对重量百分含量。
转化公式*X（%）=Y－1.6504/1.6359
其中X为凯氏定氮结果，Y为高压液相结果（如Y值小于1.6504，结果不用转化成重量百分含量，但在试验报告中需注明为相对面积百分含量）。
5.2 人血丙种球蛋白中IgG各组份相对含量计算。
5.2.1IgG各组份峰的划界。
图谱中各峰的界限为两峰间最低点到基线的垂直线。
5.2.2IgG各组份相对含量计算。
用高压液相系统的色谱工作站或积分仪对试验结果进行数据处理，算出各组份相对百分含量。
*应根据各单位使用的HPLC仪器及层析柱型号，经试验后得出转化公式。
